Определение специфических антител к гельминтам Opistorchis, Toxocara, Trichinella и Echinococcus, используемое для скрининга паразитических заболеваний человека.

Скрининговое обследование на возбудителей описторхоза, токсокароза, трихинеллеза и эхинококкоза.

Синонимы английские

Gastrointestinal parasites screening test;

Screening for Opisthorchiasis, Toxocariasis, Trichinosis, and Echinococcosis.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Opistorchis, Toxocara, Trichinella и Echinococcus – это паразитические черви, являющиеся возбудителями гельминтозов. Описторхоз возникает при попадании в организм плоских червей рода Opistorchis при употреблении зараженной речной рыбы. При этом заболевании преимущественно поражаются желчевыводящие пути и протоки поджелудочной железы. Возбудителями токсокароза являются круглые черви рода Toxocara. При токсокарозе могут вовлекаться самые разнообразные органы, в том числе легкие, глаза, головной мозг и кишечник. Трихинеллез возникает при употреблении мяса, содержащего цисты круглых червей рода Trichinella, и протекает с преимущественным поражением скелетной мускулатуры. Возбудителями эхинококкоза являются ленточные черви Echinococcus granulosus. При этом заболевании может поражаться практически любой орган, в том числе головной мозг, костная ткань, печень, глаза. В этой группе гельминтозов наиболее часто в России встречается описторхоз.

Несмотря на наличие особенностей течения разных гельминтозов, дифференциальная диагностика этой группы заболеваний не может быть осуществлена на основании клинической картины. Кроме того, часто гельминтозы протекают в стертой форме или бессимптомно. Поэтому в основе скрининга гельминтозов лежит лабораторное обследование. Скринингу этой группы гельминтозов подлежат пациенты с наличием в анамнезе указаний на употребление в пищу сырой речной рыбы (описторхоз), сырого мяса (трихинеллёз), а также контактирующие по роду деятельности с зараженными животными, почвой и водой (ветеринары, работники коммунальных служб, садоводы – токсокароз и эхинококкоз). Для идентификации возбудителей используют разные методы, в том числе микроскопический анализ кала на наличие яиц паразитов, микроскопический анализ аспирата дуоденального содержимого и мокроты на наличие личиночных форм, методы молекулярной диагностики, а также серологические тесты. Одним из наиболее точных методов диагностики гельминтозов является иммуноферментный анализ (ИФА), позволяющий определять специфические антитела к разным возбудителям.

Метод ИФА имеет несколько преимуществ по сравнению с анализом кала. С помощью анализа кала паразитов удается выявить только при достаточном их количестве. Напротив, если инфекция носит ограниченный характер, можно получить ложноотрицательный результат. С другой стороны, если гельминтоз протекает тяжело и сопровождается поражением и обструкцией желчевыводящих путей, яйца или личинки паразита могут вовсе не попадать в кишечник и поэтому не определяться в кале. Метод ИФА основан на определении в крови специфических антител к паразитам, что обуславливает его более высокую по сравнению с микроскопией кала чувствительность, которая составляет 91-92 %.

Следует отметить некоторые ограничения метода ИФА. Так, положительный результат исследования не позволяет дифференцировать текущую инфекцию и инфекцию в прошлом. По этой причине исследование не предназначено для оценки эффективности проведенного лечения. Также исследование не позволяет уточнить локализацию процесса. Результат исследования антител к эхинококку будет положительным как при изолированном поражении печени, так и при диссеминированном эхинококкозе. Следует помнить, что титр антител не всегда отражает объем поражения.

Специфичность исследования несколько уступает его чувствительности. Из-за наличия сходств в антигенной структуре этих и других гельминтов иногда могут наблюдаться ложноположительные реакции. По этой причине интерпретацию результата следует производить с учетом дополнительных клинических и лабораторных данных, в том числе результата микроскопии кала.

Так как в исследовании определяют уровень антител, результат анализа в значительной степени зависит от состояния иммунной системы организма. При наличии у пациента иммуносупрессии (ВИЧ-инфекция, прием глюкокортикоидов и других иммуносупрессантов, старческий возраст) возможен ложноотрицательный результат. Следует помнить, что иммуноглобулины класса IgG могут быть определены через 2-4 недели от начала инфекции.

Для этой группы гельминтозов характерна эозинофилия, типичная для всех инвазивных гельминтозов. Также при длительно текущей инфекции могут наблюдаться нарушения показателей общеклинических тестов (признаки мальабсорбции, анемия), поэтому при обследовании пациента с подозрением на гельминтозы из этой группы проводят дополнительные лабораторные тесты.

Для чего используется исследование?

• Для скрининга описторхоза, токсокароза, трихинеллёза и эхинококкоза.

Когда назначается исследование?

• При обследовании пациентов с указанием на употребление в пищу сырой речной рыбы (описторхоз), сырого мяса (трихинеллёз), а также контактирующих по роду деятельности с зараженными животными, почвой и водой (ветеринары, работники коммунальных служб, садоводы – токсокароз и эхинококкоз);
• при оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации;
• при устройстве на работу декретированных групп населения.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

• описторхоз, токсокароз, трихинеллёз или эхинококкоз, текущая инфекция;
• описторхоз, токсокароз, трихинеллёз или эхинококкоз, инфекция в анамнезе;
• ложноположительный результат (другие гельминтозы).

Что может влиять на результат?

• Состояние иммунной системы организма;
• время, прошедшее с момента заражения.

• Результат анализа следует оценивать вместе с данными дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных исследований;
• исследование не позволяет дифференцировать текущую инфекцию и гельминтоз в анамнезе и не предназначено для оценки эффективности лечения;
• исследование не позволяет определить локализацию и объем поражения.

14 Общий анализ крови

12 Анализ кала на цисты простейших

73 Аскаридозы, ДНК [ПЦР] (кал, мокрота)

23 Ascaris lumbricoides, IgG, титр

130 Anisakis, IgG

15 Гистологическое исследование биоптатов органов и тканей (за исключением печени, почек, предстательной железы, лимфатических узлов)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, врач общей практики, педиатр.

Информация об исследовании

Гельминтозы – группа болезней вызываемых паразитическими червями – гельминтами (глистами). Гельминты представляют собой многоклеточные животные, организмы паразитического образа жизни. Они обитают внутри другого организма и питаются за счёт пищи и тканей хозяина. Локализация гельминтов отличается большим разнообразием, они могут паразитировать во всех органах и тканях человека. Наиболее частым местом локализации считается желудочно-кишечный тракт. Лёгкие являются местом временной локализации личинок при токсокарозе. В центральной нервной системе паразитирует эхинококк, также поражая печень и лёгкие, описторхис (возбудитель описторхоза) живёт в желчных ходах печени и протоках поджелудочной железы, трихинелла (возбудитель трихинеллеза) – в мышечной ткани.

IgG вырабатываются через несколько недель после заражения и служат достоверным диагностическим признаком инфицирования.

Заболевание преобладает в регионах, в которых одним из основных продуктов в рационе человека является рыба семейства карповых – основной дополнительный хозяин червей. В случае легкой формы заболевания около 80% инфицированных не замечают никакой симптоматики, единственным проявлением может быть эозинофилия (повышение уровня эозинофилов в крови). Если в фекалиях больного содержатся от 10 тысяч и более яиц описторхов, то инфекция протекает тяжело. В таких случаях заболевание сопровождается болью в животе, отсутствием аппетита, повышением температуры, усталостью, пожелтением кожных покровов и белков глаз. Дальнейшее прогрессирование процесса приводит к отекам, увеличению желчного пузыря, поражению печени. Описторхоз ассоциируется с раком желчных протоков.

Показания к назначению исследования

1. При обследовании пациентов с указанием на употребление в пищу сырой речной рыбы (описторхоз), сырого мяса (трихинеллёз), а также контактирующих по роду деятельности с зараженными животными, почвой и водой (ветеринары, работники коммунальных служб, садоводы – токсокароз и эхинококкоз);
2. При оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации;
3. При устройстве на работу декретированных групп населения.

Подготовка к исследованию

С этим исследованием сдают

• 20.7. Лямблиоз (сумм. АТ, п/кол)
• 20.106. Амебиаз IgG (п/кол)

Результаты исследования

Гельминтозы и протозоозы наносят значительный ущерб здоровью человека. Заболевание может проявляться абдоминальным, аллергическим, анемическим синдромом, хроническим токсикозом, глисты и простейшие могут поражать ткани печени, легких, желчевыводящих путей, головного мозга, глаза.

Гельминтозы не имеют специфических симптомов, поэтому присутствие паразита можно подтвердить только лабораторными и инструментальными методами. Диагностика гельминтозов может включать гельминтоовоскопию, гельминтоларвоскопию, серологические методы, а также рентген, эндоскопию, УЗИ.

Методы диагностики гельминтозов

Исследование на гельминтозы назначается при появлении характерных клинических симптомов и на основании эпидемиологического анамнеза (содержание в доме животных, посещение зараженных мест, возможное употребление зараженного мяса или воды). Лабораторная диагностика гельминтозов может проводиться в течение нескольких часов или дней, что зависит от вида паразита, который предположительно провоцирует возникновение симптомов.

Паразитологические методы могут быть прямыми, то есть заключаются в обнаружении паразита, его фрагмента или личинки, или же применяются иммунологические методы, которые позволяют обнаружить гельминта в личиночной стадии развития, в фазе миграции, при паразитировании только самца, несильной инвазии, а также если у червя угасла или еще не развилась репродуктивная функция.

В диагностике гельминтов большое значение имеет копрологическое исследование, поскольку большинство глистов паразитируют в кишечнике, а их яйца выделяются вместе с калом. Каловые массы исследуют макроскопическим и микроскопическим способом.

С помощью макроскопического метода в фекалиях обнаруживают гельминтов или их части. В чашке Петри или небольшой плоской емкости кал смешивают с водой и рассматривают через лупу. При достаточном количестве света на темном фоне удается обнаружить белые фрагменты глиста. Все подозрительные вкрапления перекладывают на предметное стекло с глицерином для дальнейшего рассмотрения под увеличением.

Для обнаружения части гельминта может использоваться и метод отстаивания. Фекалии смешивают с водой и позволяют отстояться, после этого сливают воду. После нескольких отстаиваний, когда вода уже будет прозрачной, жидкость выливают, а осадок рассматривают в чашке Петри. При микроскопии испражнений за яйца глиста могут приниматься пузырьки воздуха, растительные клетки, споры и пыльца растений, частички непереваренной пищи.

В сомнительных случаях необходимо проводить повторные анализы. Методические указания (МУК), разработанные в 2013 году, устанавливают порядок применения метода отбора проб и описывают методы лабораторных исследований биоматериала, что позволяет применять наиболее современные методы для лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов и корректно расшифровывать их результаты.

Микроскопический метод помогает выявить личинки паразитов или их яиц. Наиболее применяемым и доступным считается нативный мазок, который позволяет увидеть яйца и личинки всех глистов. Небольшое количество перемешенного кала наносят на предметное стекло, смазанное глицерином, и рассматривают при небольшом увеличении.

В методах используется то, что имея различный вес личинки паразитов всплывают на поверхность физиологического раствора или, наоборот, оседают на дно. Если яйца тяжелее жидкости, то они скапливаются в осадке (метод седиментации позволяет выявить яйца трематод), а если легче, то яйца всплывают (метод флотации позволяет увидеть яйца власоглава, карликового цепня, анкилостомид).

В стеклянную банку помещают 2–5 г кала и заливают физиологическим раствором (400 грамм соли на литр воды), затем размешивают и дают отстояться. Спустя 45 минут, образовавшуюся пленку помещают на предметное стекло с глицерином. Другой способ поместить пленку на стекло: долить в сосуд воды до краев и накрыть предметным стеклом.

В соленой воде яйца всплывают и их можно увидеть в микроскоп, но у различных гельминтов яйца поднимаются на поверхность жидкости с различной скоростью (карликового цепня спустя четверть часа, аскарид через полтора–два часа, власоглава только через 2–3 часа). Помимо образовавшейся поверхностной пленки, обязательно нужно исследовать и осадок, так как яйца тениид, трематод, аскарид тонут при данной концентрации солевого раствора.

Преимуществами данного метода является его доступность, низкая стоимость и высокая эффективность, поэтому его часто сочетают с нативным мазком. Среди недостатков данного способа диагностики гельминтоза можно выделить необходимость исследования поверхностного слоя и осадка, а также продолжительное время для отстаивания.

Также предполагает использование насыщенного раствора натрия, но только меньшей относительной плотностью (килограмм соли нитрата натрия на литр воды), что приводит к всплытию большинства яиц гельминтов, а значит рассматривать осадок не требуется.

К недостаткам данного метода диагностики гельминтозов относят необходимость использования большого количества соли натрия и азотистой кислоты, кроме того, онкосферы тениид и яйца трематод не поднимаются на поверхность. Если раствор стоит дольше 1–2 часов, то яйца некоторых глистов набухают и уходят в осадок.

Предполагает осаждение яиц. В емкость переливают раствор изотонический. В отдельной банке смешивают фекалии с водой, отфильтровывают через марлю, и наливают поверх солевого раствора, так чтобы получилось два слоя. Спустя 2–3 часа, слой с калом убирают при помощи пипетки, а второй слой оставляют еще на 12–20 часов или помещают в центрифугу.

Осадок переливают на предметное стекло и рассматривают в микроскоп. Данный метод был предложен для поиска возбудителя описторхоза и оказался более информативным, чем микроскопия нативного мазка или метод Фюллеборна, однако, он почти не используются, поскольку технически сложен.

ПАВы, которые входят в состав стиральных порошков, освобождают яйца глистов от кала, и тем самым способствуют выпадению их в осадок. Десять грамм моющего средства растворяют в литре воды. Наливают раствор в стеклянную банку, добавляют туда испражнения и перемешивают.

За сутки в растворе образуется осадок из нескольких слоев. На дне оседают крупные частицы, в среднем слое концентрируются яйца гельминтов, вверх всплывают сероватые хлопья. Для исследования берут пипеткой 2–3 капли жидкости из второго слоя.

Дает возможность выявить даже мелкие яйца трематод, кишечных глистов и цисты простейших, он также применяется, чтобы определить интенсивность инвазии. Фекалии помещают в емкости с уксусной кислотой и перемешивают до однородности, затем процеживают, переливают во вторую пробирку и доливают эфир. Все взбалтывают и помещают в центрифугу. Образовавшийся верхний слой снимают, а осадок наносят на предметное стекло и изучают под микроскопом.

Закручивания по Шульману позволяет обнаружить в каловых массах живых личинок глистов (в частности, стронгилоида). Для анализа берется только свежий кал. Его опускают в стеклянную банку с физиологическим раствором, и размешивают круговыми движениями, не дотрагиваясь до стенок. Яйца и личинки паразитов концентрируются в центре. После перемешивания стеклянной палочкой (которой мешали) делают мазки на предметном стекле.

Использует то, что личинка двигается по направлению к теплу. С помощью данного диагностического метода можно выявить сгронгилоидоз. Так, 20–50 грамм фекалий кладут на металлическую сетку и ставят ее в воронку, в которую наливают теплую воду (40–50 ⁰С). Личинки перемещаются из кала в воду. Их оставляют отстаиваться в течение 3–4 часов. Отстоявшуюся жидкость помещают в центрифугу, а затем исследуют.

Данный метод советует ВОЗ для обнаружения анкилостомидоза у людей и проводится при необходимости дифференцировать анкилостомоз от некатороза. В центр фильтрованной бумаги наносят полграмма кала. Затем бумагу опускают в пробирку таким образом, что чистый конец оказывается в воде, а верхняя часть закрепляется пробкой, при этом фекалии не касаются воды. Пробирку помещают в термостат на 5–6 суток. За это время филяриевидные личинки оседают и их можно увидеть через лупу.

Данный метод применяется для обнаружения яиц остриц и бычьего цепня. Он предполагает проверку перианального смыва или соскоба. Сбор материала проводится утром до акта дефекации (у девушек и до мочеиспускания) или вечером, спустя 2–3 часа после того, как пациент заснул. У детей образец может быть взят после дневного сна.

Для соскоба может использоваться ватный тампон или палочка, а также клейкая лента. Ватным тампоном проводят в области перианальных складок и возле ануса. Палочку с тампоном опускают в пробирку и отправляют в лабораторию. Лаборант делает мазки на предметных стеклах и микроскопирует их.

Также является эффективным, поскольку позволяет диагностировать аскаридоз и обнаружить онкосферы тениид. Для сбора материала используется прозрачная клейкая лента длиной в 4–5 см. Ее липкой стороной прикасаются к перианальным складкам, быстро снимают и клеят на предметное стекло. Преимущество метода в том, что можно долго хранить образец.

Дополнительные способы

Лабораторная диагностика гельминтозов может включать:

• исследование содержимого кишечника . Личинки и яйца глистов, заселяющих печень, желчный пузырь, поджелудочную железу и двенадцатиперстную кишку, можно разглядеть в желчи и содержимом кишечника. Образцы для исследования берут во время дуоденального зондирования. С помощью полученных материалов можно диагностировать описторхоз, фасциолез, клонорхоз, дикроцелиоз, анкилостомидозы, стронгилоидозы;
• исследование мочи . Метод позволяет обнаружить яйца шистосом. Для проведения теста необходимо 50 мл мочи, собранной в середине дня, перелить в конический стакан и дать отстояться полчаса. Затем мочу сливают, а осадок помещают в центрифугу;
• исследование мокроты . При рассматривании образца мокроты через микроскоп можно увидеть яйца легочного сосальщика (парагонима), личинки аскариды, некатора и стронгилоида, фрагменты эхинококкового пузыря;
• исследование крови . При окрашивании биоматериала по Романовскому можно выявить личинки нематод, паразитирующих в подкожной клетчатке. Кровь нужно брать и в ночное время, поскольку личинки при некоторых тропических филяриозах заметны, только когда человек отдыхает. Анализ крови на гельминтозы информативен еще и потому что показывает пониженное количество эозинофилов, что косвенно указывает на присутствие в организме червей.

Серологические методы

Иммунологическое исследование проводится при подозрении на тяжелые тканевые гельминтозы и трематодозы. С помощью ИФА выявляют эхинококкоз, трихинеллез, альвеококкоз, токсокароз, цистицеркоз, описторхоз, фасциолез, клонорхоз. При гельминтозе в крови повышается сначала уровень титра IgM, а затем и титр IgG, что указывает на активное инфицирование.

Дифференциальная диагностика гельминтозов IgG (кач), эффективна не только при обнаружении аскарид, но и для выявления протозоозов (простейших), которые в той же мере способны навредить организму. Метод реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) позволяет обнаружить описторхоз, эхинококкоз, альвеококкоз, трихинеллез.

Эхинококкоз и альвеококкоз также можно обнаружить при использовании реакции латекс-агглютинации (РЛА), а цистицеркоз и трихинеллез подтвердит реакция кольцепреципитации (РПК). Эти методы применяются в том случае, если другими более простыми способами не удается доказать присутствие глиста в организме.

Инструментальные методы

Для выявления некоторых гельминтозов у человека, поражающих отдельные органы, проводятся инструментальные исследования:

• рентген;
• УЗИ;
• компьютерная томография;
• магнитно-резонансная томография;
• эндоскопия.

Данные методы диагностики могут применяться и для оценки тяжести поражения гельминтами внутренних органов. В редких случаях удается увидеть самих червей, чаще исследование проводится для обнаружения неспецифических признаков заражения (увеличение пораженного органа, нарушение сокращение желчного пузыря, появление кист).

Анализ крови на гельминтозы является менее информативным, поскольку указывает только на развитие иммунного ответа организма, а это значит, что инвазия была, но когда именно не известно.

Как сдавать анализ на определение того или иного вида гельминта, подскажет лечащий врач.

Как правило, специальной подготовки не требуется (венозная кровь сдается натощак, материал для исследования кала берется из трех разный мест и хранится не дольше 8 часов). Если в испражнениях не выявлены глисты, то это не говорит о том, что они отсутствуют в кишечнике и, скорее всего, будут проведены повторные анализы кала.

О методе

Иммуноферментный анализ крови на паразитов является одним из самых востребованных обследований в настоящее время. Он позволяет провести диагностику латентных форм заболеваний, обнаружить инвазию на ранних стадиях у взрослых и детей.

Суть метода ИФА заключается в обнаружении реакции иммунной системы человека на присутствие в организме тех или иных паразитов, то есть в определении антител (иммуноглобулинов) к определенным антигенам (чужеродным клеткам).

Достоверность анализа оценивается близко к 90-95%. Выявление комплексов из антител и антигенов позволяет установить, какому паразиту принадлежит этот антиген, на какой стадии находится болезнь, какова интенсивность инвазии. В этом преимущество ИФА перед другими методами. Например, серологическое обследование нередко дополняет анализ кала на паразитов, он считается самым достоверным, но не всегда дает полную информацию, к тому же требует минимум 3-кратного забора материала и быстрой доставки в лабораторию. После заражения человека глисты должны в течение определенного времени дозреть до взрослой стадии, чтобы отложить яйца, которые потом появляются в испражнениях пациента. Кроме этого, существует ряд причин, не позволяющих обнаружить присутствие паразита по анализу кала (прием лекарств, неправильный сбор материала, нежелание пациента сдавать кал несколько раз и т.д.).

О показаниях

Любая диагностика должна быть обоснованной и рациональной. Обследование на ИФА обычно назначают в следующих случаях:

• в общем анализе крови у пациента выявлена повышенная концентрация эозинофилов (показатель аллергической сенсибилизации организма) и (или) низкое содержание гемоглобина, высокий лейкоцитоз при отсутствии других причин для их появления;
• присутствуют жалобы и симптомы, подозрительные на наличие гельминтов (неустойчивый стул, боли в животе неопределенного характера, похудение при хорошем аппетите, продолжительный кашель и т.д.);
• другие анализы на паразитов не дали результата у пациента с подозрительной на гельминтоз клиникой;
• есть хронические болезни органов пищеварения, мочеполовой системы;
• глисты обнаружены у домашних питомцев;
• проводится плановая (у беременных, путешественников) или внеплановая (по эпидемиологическим показаниям) диагностика;
• диспансеризация лиц, работающих с животными, на мясокомбинате, с канализационными стоками и т.д.;
• желание пациента пройти обследование на паразитов.

Данный анализ особенно имеет значение при диагностике следующих заболеваний:

• эхинококкоза;
• описторхоза;
• лямблиоза;
• трихомониаза;
• токсоплазмоза;
• цистециркоза;
• фасциолеза;
• амебной дизентерии;
• токсокароза;
• трихинеллеза.

О возможностях

Для получения наиболее достоверных результатов забор крови из вены на ИФА проводится с соблюдением следующих правил:

• анализ сдают утром на голодный желудок – последний прием пищи должен быть 10-12 часов назад;
• за сутки до обследования нельзя курить, принимать спиртные напитки, есть жирные и соленые продукты;
• за неделю до анализа надо прекратить прием лекарств;
• накануне забора крови желательно исключить тяжелые физические нагрузки, избегать психоэмоционального перенапряжения.

При невозможности выполнения всех требований, надо поставить в известность врача.

Сдать кровь на этот популярный среди населения анализ можно в любой современной лаборатории, оснащенной необходимым оборудованием, которая есть в каждом крупном городе, например, в офисах Инвитро.

Оценка результатов исследования проводится врачом индивидуально в каждом случае. Анализ показывает наличие антител (иммуноглобулинов) разных классов, например:

• иммуноглобулины класса A обнаруживают в острой фазе заболевания;
• класс M свидетельствует о недавнем заражении, эти антитела исчезают из крови в течение года;
• класс G говорит о хроническом процессе, давнем заражении, такие иммуноглобулины сохраняются в крови всю жизнь.

Бывают сложные случаи перекрестной реакции с антителами других паразитов, ложноположительные результаты и др. Разбираться со всем этим должен специалист, обычно берется во внимание клиническая картина и результаты других обследований. Только комплексное обследование вкупе с симптомами и жалобами больного дает основание для постановки диагноза и назначения лечения.

Данное видео рассказывает о ИФА крови на паразитов:

Диагностика – первый и важный этап медицинской помощи, от успешности которого зависит эффективность назначаемой терапии при любом заболевании. Это утверждение справедливо и для паразитарных болезней, большинство из которых не вызывают специфических симптомов, поэтому поиски причин полностью сводятся к назначаемым анализам. Из самых современных и высокоинформативных следует выделить иммуноферментный анализ. Он даёт представление не только о наличии антител к определённому виду паразитов, но выявляет количественную характеристику этих антител, которая даёт информацию о стадии заболевания или о ходе лечения.

Преимущества и недостатки

Иммуноферментный анализ крови (ИФА) на паразитов произвёл настоящую революцию в лабораторной аналитике паразитологии, на что есть целый ряд причин:

• Высокая чувствительность метода. Даже если в образец попадёт единственный элемент организма паразита, этого будет достаточно, чтобы получить удовлетворительный результат. Другие лабораторные методы анализов не могут конкурировать с ИФА по этому показателю.
• Специфичность метода. Безошибочность диагностики исключает неправильную идентификацию возбудителя, поскольку за реакцию отвечают специфические антитела. То есть, вид паразитов, вызвавший заболевание, при ИФА не может быть спутан даже с очень близким по внешнему виду или хромосомному набору.
• ИФА с успехом заменяет бактериологический метод, который требовал более длительного периода до получения данных и подразумевал проведение лечения вслепую до ознакомления с результатами. Иммуноферментный метод позволяет получить данные в течение двух суток.
• Высокий уровень технологичности сводит к минимуму ошибки, вызванные влиянием человеческого фактора, который остаётся неизменно высоким при других методах. Это гарантирует высокую точность диагностики и исключает значительные погрешности.
• ИФА даст результаты даже на начальных стадиях заражения, когда остальные анализы ещё не выявят ни возбудителей, ни их продуктов жизнедеятельности.
• Можно узнать, на какой стадии развития в момент забора крови находился возбудитель: циста, личинка или взрослая особь.

У метода есть и определённые недостатки:

• Расшифровкой полученных данных должен заниматься только квалифицированный специалист.
• В назначении на анализ должен быть безошибочно указан тип возбудителя, то есть врач должен заранее предполагать, наличие какого паразита могло вызвать начало болезни.
• Для проведения иммуноферментного определения гельминтов необходима высокотехничная лаборатория со специализированным оборудованием и высококвалифицированным персоналом, прошедшим специальную подготовку и получившим соответствующие сертификаты о праве выполнения ИФА. Такие лаборатории встречаются далеко не в каждой больнице.
• Высокая стоимость. Аналогичные методики стоят в разы дешевле, поэтому иммуноферментный анализ иногда недоступен по цене для пациентов из социальных групп с низкой платежеспособностью.

Иммуноферментный анализ крови на паразитов выполняют только по направлению от специалиста, в котором указано, на какой тип гельминтов или группу необходимо проверить пациента. Без направления пробу крови в лаборатории попросту не возьмут.

Принцип действия

Основной принцип заключается в образовании комплекса антигенов с антителами. Процесс зависит от двух составляющих:

• Иммунный ответ. Он означает, что искомая часть в пробе связывается с молекулами того препарата, который добавляется по методике. Это приводит к образованию особого комплекса, не возникающего, если добавляемый препарат не будет рассчитан на имеющийся тип паразитов.
• Ферментативная реакция. После образования комплекса лаборант судит о результате по появлению определённой окраски. После этого результаты можно увидеть, оценить и измерить.

Такой подход обеспечивает очень высокую результативность – около 99,97%.

Биоматериал для анализа

Для проведения иммуноферментного анализа на паразитов у пациента берут пробу венозной крови в объёме 3-5 см 3 . Дальше в лаборатории все форменные элементы (эритроциты, гемоглобин и пр.) отделяют, а для теста оставляют только сыворотку желтоватого цвета, в которой содержатся необходимые антигены.

Биоматериал отбирают из локтевой вены. Чтобы избежать ложных результатов, кровь сдаётся натощак. За две недели до анализа для достоверности результатов нужно отказаться от любых антибиотиков и алкоголя. Также просят перед исследованием не пить газированную воду.

В тех случаях, когда исследование проводят для новорожденных детей, биоматериалом может быть плацента или пуповинная кровь.

Как проводится

Кровь помещают в стерильную лабораторную пробирку. К имеющемуся образцу добавляют лабораторные заготовки с антителами к тем паразитам, которые пытаются определить у пациента. На образование комплекса уходит несколько суток.

В сложных случаях, когда для начала лечения нужны срочные данные, применяют лабораторные методы катализа процесса для ускорения реакции. Цена таких методик ещё выше, но они немного уступают классическим в точности. Зато эти экспресс-методики позволяют получить ответ уже через 2-3 часа после отбора биологического материала.

Расшифровка полученных данных

Заниматься интерпретацией результатов ИФА может только специалист, направивший пациента на тестирование. Иногда для того, чтобы получить реальную картину, необходим сравнительный анализ свежих данных с теми, которые были получены раньше.

Иммуноферментная методика предоставляет данные о трёх типах иммуноглобулинов (антител):

• IgM. Появляются в крови на четвёртые сутки после заражения и наращивают свою концентрацию, потом она идёт на спад, и после шести недель эти вещества уже могут не присутствовать в пробе. Их наличие показывает, что процесс протекает остро, и паразиты активно размножаются в кишечном тракте или других органах и системах органов.
• IgG. Начинают вырабатываться после третьей-четвёртой недели заражения и могут сохраняться на протяжении нескольких месяцев или лет. Такая картина говорит о том, что заболевание приняло хроническую форму и протекает скрыто. При рецидивах уровни IgМ и IgG параллельно увеличиваются.
• IgA. Этот тип иммуноглобулинов начинает появляться после двух недель присутствия паразитов в организме, а исчезает после одного-двух месяцев. Значительное повышение уровня может указывать на начало рецидива.

Адекватно оценить все эти показатели, их взаимодействие и реальную картину может далеко не каждый врач, а только высококвалифицированный специалист. Поэтому категория врача в этом отношении играет не меньшую роль, чем уровень лаборатории, где проводят исследования.

Результаты пациенту предоставляют на стандартном бланке лаборатории в виде таблицы, в которой перечислены все антитела, а напротив них указаны плюсы (в случае обнаружения) или минусы (если элементы не выявлены). Также указываются данные в количественном выражении, свидетельствующие о концентрации найденных веществ в условных единицах.

Стоимость

Иммуноферментный анализ входит в категорию дорогостоящих, но его цена отличается в зависимости от региона и уровня лаборатории.

Читайте также: